资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
文章类型:
机构:
[1]广东省中医院检验科,广州,510120
大德路总院
检验科
广东省中医院
[2]广州医科大学附属脑科医院检验科,广州,510370
[3]广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,524023
出处:
ISSN:
关键词:
人类端粒酶末端逆转录酶
bax inhibito r-1
RN A干扰
摘要:
目的:利用LipofectamineTM2000将针对靶向人类端粒酶末端逆转录酶(hTERT)和Bax inhibitor‐1(Bi‐1)基因设计并构建的质粒载体转染至CNE‐2Z鼻咽癌细胞内,诱导序列特异性的基因沉默,研究其产生的shRNA阻抑hTERT 和Bi‐1基因表达的效果。方法收集CNE‐2Z细胞,设未处理组、pEGFP‐N1组、pEGFP‐N1/Lip组,采用流式细胞术检测Lip对CNE‐2Z细胞的转染能力,RT‐PCR和Western blot法分析表达shRNA重组质粒载体对hTERT和Bi‐1基因mRNA表达的抑制效应。结果转染CNE‐2Z细胞的质粒和Lip最佳组合:质粒为2.5μg ,Lip为6.25μL。结论成功构建的针对人hTERT和Bi‐1基因的shRNA真核表达质粒能特异、有效地阻抑hTERT和Bi‐1基因的表达。
基金:
广东省科技计划项目基金资助项目(2011B031800207)。
基金编号:
2011B031800207
第一作者:
第一作者机构:
[1]广东省中医院检验科,广州,510120
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
王会敏,何柯新,徐建华,等.利用 RNAi阻抑 hTERT 和Bi-1双基因表达的RNAi作用效果的研究[J].重庆医学.2015,44(08):1012-1016.