摘要:
目的 研究Notch1信号通路对丹参制剂诱导大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)向神经元样细胞分化过程的影响.方法 取第3代BMSCs,待细胞增殖到60%~70%融合时进行预诱导,预诱导24 h后,更换含100 mL/L丹参注射液的DMEM/F12培养液进行诱导分化.待细胞培养0、3、5 和7 h,对各组进行形态学观察,RT-PCR和相对定量PCR(qPCR)检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(Nestin)及Notch1的mRNA表达.结果 丹参制剂诱导3 h后,细胞形态发生改变,可见少量突起,诱导培养5 h后细胞突起增多相互交织,呈类神经元细胞分化;诱导7 h后,细胞形态和突起生长情况无明显变化.空白对照组细胞数量有所增加,但细胞形态改变不明显.PCR检测发现,丹参制剂组诱导0、3 和5 h,NSE和Nestin的mRNA表达随诱导时间的增加,表达量逐渐增加(P<0.05);诱导7 h,NSE和Nestin的mRNA表达量与5 h相比有所降低,但降低不明显(P>0.05).丹参制剂组诱导0、3、5 和7 h,Notch1的mRNA表达随诱导时间的增加,表达量逐渐降低(P<0.05);同一诱导时间(3、5 和7 h)Notch1的mRNA表达量与空白对照组比较降低更加明显(P<0.05).结论 丹参制剂可以促进BMSCs向神经元样细胞分化,且能够抑制Notch1信号通路关键因子Notch1的mRNA表达,提示丹参制剂诱导BMSCs向神经元样细胞分化可能与Notch1信号通路有关.