资源类型：
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◇ 统计源期刊
文章类型：
机构：
[1]广东医学院衰老研究所,广东东莞,523808
[2]广东省中医院检验科,广州,510370
大德路总院
检验科
广东省中医院
[3]广东省医学分子诊断重点实验室,广东东莞,523808
出处：
ISSN：
关键词：
基因表达
金属硫蛋白2A
重组质料
大肠埃希菌
摘要：
目的 构建重组金属硫蛋白2A(MT-2A)原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,为进一步研究MT-2A奠定基础.方法 从人骨骼肌细胞cDNA文库中PCR扩增MT-2A基因DNA序列,构建重组表达质粒MT2A-pET32a,PCR与DNA测序法鉴定插入序列;重组细菌用IPTG诱导表达,His-bind亲和层析柱纯化MT-2A蛋白,Western blotting鉴定蛋白特性.结果 扩增获得的MT-2A基因片段长186 bp,DNA测序证实MT2A-pET32a重组质粒构建正确;表达的融合蛋白相对分子质量约为29×103,Western blotting证实为目的 蛋白.结论 成功构建了重组原核表达质粒MT2A-pET32a,在大肠埃希菌内诱导表达并纯化获得MT-2A.
基金：
国家自然科学基金(30672205;30871440;30971620;81170327),广东省自然科学基金(9252402301000002;7301506),广东省高校自然科学研究重点项目(06Z015),广东省医学科研基金(B2009191),湛江市科技局招标项目(ZZ0605),东莞市科技计划项目(2008108101045)
基金编号：
30672205;30871440;30971620;81170327
第一作者：
第一作者机构：
[1]广东医学院衰老研究所,广东东莞,523808
[2]广东省中医院检验科,广州,510370
[3]广东省医学分子诊断重点实验室,广东东莞,523808
通讯作者：
通讯机构：
[1]广东医学院衰老研究所,广东东莞,523808
[3]广东省医学分子诊断重点实验室,广东东莞,523808
推荐引用方式(GB/T 7714)：
刘振杰,赵树勇,周静,等.重组金属硫蛋白2A质粒的构建与表达[J].国际检验医学杂志.2012,33(05):513-514+516.
