摘要:
目的构建能复合表达绿色荧光蛋白和白介素-2重组卡介菌(rBCG-GFP-IL-2).方法采用基因工程技术构建pDmGFP-IL-2重组穿梭质粒,用电穿孔法将重组质粒pDmGFP-IL-2转化大肠杆菌和卡介菌中,采用限制酶切,荧光显微镜下观察及PCB方法鉴定pDMGFP-IL-2和rBCG-GFP-IL-2.结果琼脂糖凝胶电泳结果显示pDmGFP-IL-2质粒的限制酶切条带,PCR法检测重组BCG菌株可见明显IL-2片段扩增条带约0.3kb,rBCG-GFP-IL-2液体培养菌液在长波紫外线的照射下,发出明亮的绿色荧光,小鼠皮下接种rBCGGFP-IL-21周后,取组织冰冻切片在荧光显微镜下可见绿色荧光.结论成功构建了重组质粒pDMGFP-IL-2和共表达绿色荧光蛋白和白介素-2重组BCG(rBCG-GFP-IL-2).