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人胚神经干细胞植入脑损伤大鼠的存活和分化状态

Survival and differentiation of human embryonic neural stem cells in rats with brain injury

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资源类型:

收录情况: ◇ CSCD-E

机构: [1]广东省中医院神经外科,广东省广州市 51012O [2]北京市神经外科研究所,北京市100050
出处:
ISSN:

关键词: 干细胞 药物作用 神经系统 细胞分化 爆震伤

摘要:
背景:神经干细胞的发现为中枢神经系统损伤修复带来希望,但脑损伤 后的内部环境对神经干细胞存活和分化的影响是一个复杂多变的过程。 目的:观察大鼠脑液压冲击伤后植入的入胚神经干细胞存活情况和分化 状态。 设计:开放性实验。 单位:广东省中医院神经外科,北京市神经外科研究所。 材料:实验于2002-09/2003—03在北京市神经外科研究所神经干细胞 室完成。选取SD雌性大鼠24只(购自中国医学科学院实验动物研究 所,动物质量合格证号:SCXK(京)2002—2003),7周龄,体质量(250~ 1O)g。8周龄流产胎儿大脑(产妇及其家属均同意提供),流产过程中B 超监测胎儿的存活状况。BrdU单克隆抗体(Sigma公司),兔抗巢蛋白多 克隆抗体(chemicon公司), 鼠抗微管相关蛋白2单克隆抗体 (Neomarkers公司),兔抗胶质纤维酸性蛋白多克隆抗体(Biogenex公司)。 方法:① 取8周龄流产胎儿大脑皮层细胞,体外培养获得人胚神经干细 胞。② 大鼠制作液压冲击伤模型。大脑皮质运动感觉区骨窗位置:以前囟 为零点, 向后2.5 mm, 中线右3.O mm。液压冲击参数: 冲击压力 0.3 MPa,冲击时间25 ms,冲击次数为1次。③ 伤后24 h在损伤区移 植标有BrdU的人胚神经干细胞,1周和4周后处死大鼠,邻片行BrdU/ 微管相关蛋白2和BrdU/胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学双染。 主要观察指标:①人胚神经干细胞移植后的存活及迁移。②人胚神经干 细胞移植后的分化。 结果:①BrdU阳性细胞为椭圆形棕褐色,移植后1,4周均可见其存活并 向周围迁移,且移植后4周迁移的范围更广。② 移植后1周,皮质颗粒层 和皮层下均见较多的BrdU阳性细胞,且BrdU/微管相关蛋白2双阳性 细胞多于BrdU,胶质纤维酸性蛋白双阳性细胞;移植后4周,BrdU 阳 性细胞数明显减少,脉络丛和微血管中可见BrdU阳性细胞。且BrdU/ 胶质纤维酸性蛋白双阳性细胞多于BrdU/微管相关蛋白2双阳性细胞。 结论:人胚神经干细胞能够存活于脑损伤区域,移植后逐渐分化为星形 胶质细胞,且易被内皮吞噬细胞所消化。提示免疫排斥反应可能影响人 胚神经干细胞的存活。

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第一作者:
第一作者机构: [1]广东省中医院神经外科,广东省广州市 51012O
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