摘要:
【目的】观察关节康片对膝关节损伤小鼠血液和膝关节中白细胞介素6(IL-6)水平的影响以及与IL-6相关炎症因子含量的关系,建立准确评价该制剂功效的方法。【方法】将30只小鼠分为空白对照组,模型对照组,关节康低、中、高剂量组,每组6只。除空白对照组,其余各组小鼠建立膝关节损伤模型,各给药组以不同剂量关节康片粉末溶液灌胃,连续7 d后,处死空白对照组全部小鼠及其余各组部分小鼠。对于未处死动物,原属模型对照组的小鼠继续正常饲育(此设为模型对照观察组),原各给药组停止给药,正常饲育(此设为关节康低、中、高剂量观察组),继续观察至小鼠恢复正常行走。采用酶联免疫吸附分析(ELISA)测定血浆和膝关节匀浆液中IL-6含量,对比各组IL-6含量的变化,以验证关节康片通过调控IL-6水平促进膝关节损伤修复的假说;同时,以各组血浆和膝关节匀浆液中IL-6相关炎症因子为生物标记物,使用液相色谱-质谱联用法(LC-MS)法建立同时测定方法,根据结果进一步明确该制剂促进膝关节损伤修复的生物学基础并建立准确、科学、可量化的病程及疗效评价方法。【结果】ELISA结果显示,关节康片对膝关节损伤模型小鼠的IL-6水平有显著调节作用。IL-6相关炎症因子测定结果显示,LXB4、PGE1、(±)12-HETE、±5(6)DiHET、PGE2等成分在不同组中含量差异明显,在血浆和膝关节匀浆液也存在显著性差异,但变化趋势基本相同。【结论】关节康片可通过调控机体IL-6表达,促进膝关节损伤的修复,并可通过测定血液中多个IL-6相关炎症因子的含量对病程和疗效进行准确、可量化的评价。