目的研究耐碳青霉烯类大肠埃希菌（CREC）对替加环素异质性耐药的分子机制,为临床治疗和合理应用抗生素提供依据。方法收集2017年1月至2019年3月间多中心分离的CREC,用改良E-test法和菌群谱型分析微量滴定法（MPAP）初筛,群体谱分析法（PAP）确认CREC对替加环素的异质性耐药情况,并用荧光定量RT-qPCR分析外排泵相关基因、外排泵调节基因和膜孔蛋白基因的表达。结果改良E-test法和MPAP法筛查CREC对替加环素异质性耐药（CREC-TGC-HR）的阳性率分别为25.0%（14/56）和39.3%（22/56）。经PAP法确认,有37.5%（21/56）为阳性。改良E-test法的CREC-TGC-HR检出率低于PAP法,差异有统计学意义（P(0.05）。3家医院CREC-TGC-HR的检出率分别是43.8%（7/16）、43.5%（10/23）和23.5%（4/17）,两两比较差异均无统计学意义（P)0.05）。与CREC-TGC-HR原始菌株相比,耐药亚群外排泵基因acrA、acrB表达分别上调1.79倍、5.01倍;其相关调控基因marA、marB表达分别上调5.38和2.18倍;膜孔蛋白基因ompC表达下调2.35倍,差异均有统计学意义（P(0.05）。膜孔蛋白基因ompF和ompX的表达比较差异无统计学意义（P)0.05）。结论首次报道CREC对替加环素异质性耐药,且异质性耐药率较高,需要采用有效的方法检测CREC-TGC-HR,为临床治疗和合理应用抗生素提供依据。