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文章类型：
机构：
[1]中山大学附属第三医院脊柱外科,广东 广州 510630
中山大学附属第三医院
[2]广州中医药大学第二附属医院器官移植科,广东 广州510006
大德路总院
器官移植科
广东省中医院
[3]南方医科大学第三附属医院脊柱外科,广东 广州 510515
[4]南方医科大学第三附属医院骨科中心小儿骨科,广东 广州 510515
出处：
ISSN：
关键词：
GelMA水凝胶
软骨损伤
外泌体
免疫调节
摘要：
目的 分探究负载骨髓干细胞来源外泌体的GelMA水凝胶对软骨损伤的修复情况.方法 首先利用超速离心法分离提取出骨髓干细胞上清液中的外泌体,并通过外泌体透射电镜、粒径分析以及Western blot检测外泌体表面marker.检测负载外泌体的GelMA水凝胶相关性能(包括流变以及电镜).通过BCA测蛋白法检测外泌体的释放情况,以及通过PKH26红色荧光染料标记外泌体,观察外泌体被RAW264.7细胞吞噬情况.将RAW264.7细胞种在孔板表面,分为空白对照组(Control组)、单纯外泌体组(Exo组)、单纯水凝胶组(GelMA组)、负载外泌体的水凝胶组(GelMA-Exo组).通过q-PCR以及免疫荧光检测负载外泌体的GelMA水凝胶对于RAW264.7细胞极化的影响.建立材料/RAW264.7细胞/软骨细胞Transwell共培养模型,上室为软骨细胞,下室为材料/RAW264.7细胞,分组与上面一致,通过q-PCR以及免疫荧光检测损伤软骨细胞的修复情况.构建大鼠膝关节软骨损伤模型,分为假手术组(Sham组)、单纯损伤组(SI组)、单纯水凝胶组(GelMA组)以及负载外泌体的水凝胶组(GelMA-Exo组),通过HE和Masson染色检测软骨修复情况.结果 通过对提取的细胞进行多系分化能力的检测,成功获取了骨髓干细胞.通过透射电镜、粒径分析以及Western blot检测,成功分离出骨髓干细胞外泌体.负载外泌体的GelMA水凝胶明显促进RAW264.7细胞向M2型极化(P<0.05).体外共培养模型表明负载外泌体的GelMA水凝胶能显著促进损伤软骨细胞的修复通过调节RAW264.7细胞由M1型向M2型转化(P<0.05).HE和Masson染色表明负载骨髓干细胞来源外泌体的GelMA水凝胶明显促进软骨损伤的修复.结论 负载骨髓干细胞来源外泌体的GelMA水凝胶能够通过改善免疫微环境明显促进大鼠软骨损伤的修复.
基金：
南方医科大学第三附属医院院长基金面上项目（YM2021013）；
广东省自然科学基金面上项目（2020A1515010372）
PubmedID：
第一作者：
第一作者机构：
[1]中山大学附属第三医院脊柱外科,广东 广州 510630
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
管鹏飞,崔瑞文,王其友,等.负载骨髓干细胞来源外泌体的3D水凝胶通过调节免疫促进损伤软骨的修复[J].南方医科大学学报.2022,42(4):528-537.
