资源类型:
申请人:
广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)
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当前专利权人:
广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)
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申请号:
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摘要:
本发明中公开了一种红细胞热放散洗脱试剂盒及其在ABO血型鉴定中的应用。该红细胞热放散洗脱溶液包括如下组分:甘氨酸7.0~8.0g/L,氯化钠4.0~6.0g/L,甘油50.0~60.0g/L。本发明中的红细胞热放散洗脱溶液配制方便、溶液性质稳定,用于热放散实验成功率高,可用于热放散试验中解离红细胞膜上结合的ABO血型系统抗体IgM、IgG,抗体脱落后,通过检测放散液中的抗体可确定受检者ABO血型,另外,本发明中的红细胞热放散洗脱溶液可以保护红细胞膜的完整性,放散后的红细胞溶血程度较低,可再用于血型正定型检测。
主权项:
1.一种ABO血型鉴定方法,其特征在于,所述鉴定方法使用的红细胞热放散洗脱溶液配方包括如下组分:甘氨酸7.0~8.0g/L,氯化钠4.0~6.0g/L,甘油50.0~60.0g/L,pH6.0~6.2;所述鉴定方法包括如下步骤:(1)①将已知ABO血型抗原的待检红细胞用生理盐水洗涤,分别加入等体积的抗-A抗体血清或抗-B抗体血清,混合均匀,然后放置于4±2℃冰箱中至少30min,使细胞充分吸收;或:②将待检红细胞用生理盐水洗涤后分成两份,一份加入等体积的抗-A抗体血清,另一份加入等体积的抗-B抗体血清,混合均匀,然后放置于4±2℃冰箱中至少30min,使细胞充分吸收;或:③将待检红细胞用生理盐水洗涤后,加入等体积的抗-H抗体血清,混合均匀,然后放置于4±2℃冰箱中至少30min,使细胞充分吸收;(2)将步骤(1)中吸收完成的红细胞悬液离心,取上清,得到吸收后的抗血清;然后再用标准试剂红细胞检测吸收前后抗血清效价:若加入抗-A抗体血清吸收后的抗血清效价下降,则表示受检者红细胞具有A抗原,否则表示不具有A抗原;同理,若加入抗-B抗体血清吸收后的抗血清效价下降,则表示受检者红细胞具有B抗原,否则表示不具有B抗原;若加入抗-H抗体血清吸收后的抗血清效价下降,则表示受检者红细胞具有H抗原,否则表示不具有H抗原;确定存在A、B或H抗原后进行下一步操作;(3)将步骤(1)中吸收完成的细胞用冰的生理盐水离心洗涤6次以上,然后按等体积加入所述的红细胞热放散洗脱溶液,56℃水浴9~10min,期间周期轻摇细胞使抗体充分放散;(4)放散结束后离心,取上清,得到放散液;(5)对放散液进行检测,得到受检红细胞血型。