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摘要:
本发明涉及药物分析技术领域,具体公开了健脾益肺方中毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷的含量测定方法。该方法采用液相色谱法进行测定,具体包含如下步骤:供试品溶液制备步骤;色谱条件确定步骤;供试品溶液测定以及毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷含量计算步骤;所述的色谱条件为:色谱柱选用C18色谱柱;检测波长为250~280nm;流速为0.8~1.5mL/min;进样体积为10~20μL;以含0.05~0.2体积%磷酸的水为流动性A,乙腈为流动性B,采用梯度洗脱。本发明首次建立了健脾益肺方中毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷的含量测定方法,该方法准确可靠、稳定性及重复性好、检出限低。
主权项:
1.健脾益肺方中毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷的含量测定方法,其特征在于,采用液相色谱法进行测定,具体包含如下步骤:供试品溶液制备步骤;色谱条件确定步骤;供试品溶液测定以及毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷含量计算步骤;所述的色谱条件为:色谱柱选用C18色谱柱;检测波长为250~280nm;流速为0.8~1.5mL/min;进样体积为10~20μL;以含0.05~0.2体积%磷酸的水为流动相A,乙腈为流动相B,采用梯度洗脱;梯度洗脱包含如下几个洗脱阶段:0~6min,流动相B的体积分数变化为10%~20%;6~17min,流动相B的体积分数变化为20%~20.4%;17~35min,流动相B的体积分数变化为20.4%~40%;35~40min,流动相B的体积分数变化为40%~60%;40~45min,流动相B的体积分数变化为60%~85%;所述的供试品溶液制备步骤的具体方法包含如下步骤:(1)按如下重量份称取中药原料,得健脾益肺方:柴胡10~20份,黄芪40~60份,熟党参40~60份,白术20~30份,燀桃仁10~20份,锁阳20~30份,广升麻10~20份,黄荆子20~30份;(2)将健脾益肺方加水提取1~3次,将提取液合并、浓缩后得浓缩液;每次提取时间为1~3h,每次提取水的用量与健脾益肺方的用量比为6~12mL:1g;浓缩后浓缩液的体积与健脾益肺方的质量比为:1~2mL:1g;(3)精密移取步骤(2)所述的浓缩液4~6mL至容量瓶定容至10mL,静置、离心后将上清液减压浓缩至干,再加入1.5~2.5mL甲醇复溶,过滤即得所述的供试品溶液。