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摘要:
本发明提供结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法,设计对结核分枝杆菌进行定性、定量检测的引物、自身淬灭探针,引物的上游引物为5’-ACTCCATGGGATACGGCCCAGACTCCT-3’,下游引物为5’-CGCAAGCTTCATTCCACCGCTACACCAG-3’,自身淬灭探针的上游引物为5’-cgcgCTCGTAGGTGGTTTGTCGC(FAM)G-3’,下游引物为5’-CCCGCACGCTCACAGTTAAG-3’,上游引物3’端最后一个碱基为G,在3’端的第二个碱基为C,在这个C上标记荧光物质FAM,在探针的5’端引入几个和3’末端互补的碱基(cgcg)以便自身配对形成发夹结构。通过提取待测样品的DNA,再结合实时荧光定量PCR检测技术,可达到准确定量待测标本中结核分枝杆菌DNA的目的。
主权项:
1.一种检测结核分枝杆菌的实时荧光定量PCR试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包含用于对结核分枝杆菌进行定性、定量检测的引物和自身淬灭探针,所述引物的上游引物为5’-ACTCCATGGGATACGGCCCAGACTCCT-3',下游引物为5'-CGCAAGCTTCATTCCACCGCTACACCAG-3',所述自身淬灭探针的上游引物为5'-cgcgCTCGTAGGTGGTTTGTCGC(FAM)G-3',下游引物为5'-CCCGCACGCTCACAGTTAAG-3',上游引物3’端最后一个碱基为G,在3’端的