目的：选用以清热为主的热毒宁注射液，以温阳为主的参附注射液，对比观察清热、温阳两个相反治则中药联合吉非替尼对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、干性特征及代谢的影响。方法：选用不同的非小细胞肺癌细胞株，分别用吉非替尼(5、10、20μmol·L-1)、热毒宁注射液（0.6%、0.9%）、参附注射液（0.6%、0.9%）、吉非替尼联合热毒宁注射液、吉非替尼联合参附注射液干预，采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测各组细胞的增殖情况；利用流式细胞术检测细胞的凋亡情况；运用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺癌干细胞标志物性别决定区Y框蛋白2（Sox2）、乙酰脱氢酶家族成员A1 （ALDH1A1）mRNA及蛋白表达水平；采用飞秒激光无标记影像（FLI）技术检测肺癌细胞氧化还原比，运用能量代谢仪检测细胞的糖酵解水平。结果：与空白组比较，热毒宁注射液能降低肺癌细胞存活率（P＜0.05），提高细胞凋亡率（P＜0.05），下调干细胞标志物Sox2和ALDH1A1 mRNA及蛋白表达水平（P＜0.05）、上调细胞的氧化还原比（P＜0.05），而参附注射液对细胞存活率、细胞凋亡率、Sox2和ALDH1A1的mRNA、蛋白表达水平及细胞氧化还原比的影响差异无统计学意义。与吉非替尼单药比较，热毒宁注射液联合吉非替尼可明显抑制肺癌细胞存活率（P＜0.05），促进肺癌细胞凋亡（P＜0.05），下调干细胞标志物Sox2和ALDH1A1 mRNA及蛋白表达水平（P＜0.05），上调细胞氧化还原比（P＜0.05），下调细胞糖酵解质子流出速率（P＜0.05），参附注射液联合吉非替尼对肺癌细胞的增殖、凋亡、干细胞标志物的表达水平、细胞氧化还原比及细胞糖酵解水平影响差异无统计学意义。结论：清热中药热毒宁注射液可能通过调控肿瘤细胞的代谢，抑制其干性特征来增强吉非替尼对肺癌细胞的增殖抑制和促凋亡作用，温阳中药参附注射液对吉非替尼无明显的增效作用，表明表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）应考虑与“清热”治则的中药联合应用。