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氧化应激诱导自噬抑制人骨髓间充质干细胞(hbmsc)增殖和凋亡

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-E

机构: [1]广州中医药大学第三附属医院运动医学科 [2]广东省中医院运动医学科
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关键词: 骨髓间充质干细胞( BMSC) 氧化应激 自噬 过氧化氢( H2O2

摘要:
目的 探讨H2O2诱导氧化应激反应对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)自噬和凋亡的影响。方法 分离培养hBMSC,分为空白组(只加培养基)、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理组、 H2O2处理组、 H2O2联合3-MA处理组。采用2′, 7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色检测hBMSC活性氧(ROS)水平,CCK-8法检测(0、 50、 100、 200、 400)μmol/L H2O2对hBMSC增殖的影响;单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光胺基探针染色、溶酶体荧光探针LysoTracker Red染色观察细胞自噬水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞beclin 1、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的mTOR (p-mTOR)、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 caspase-3蛋白表达。结果 与空白组、 3-MA预处理组比较,H2O2处理组细胞内ROS水平升高、细胞自噬体增加,细胞增殖和凋亡率显著降低;beclin 1、 mTOR、 c-caspase-3蛋白表达上调,p-mTOR蛋白表达下调。与3-MA处理组比较,H2O2联合3-MA处理组细胞内ROS水平升高、细胞自噬体增加,细胞凋亡率升高不明显;beclin 1、 mTOR、 c-caspase-3蛋白表达上调,p-mTOR蛋白表达下调。结论 H2O2可诱导hBMSC产生氧化应激,hBMSC自噬增强,细胞增殖和凋亡降低。

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第一作者:
第一作者机构: [1]广州中医药大学第三附属医院运动医学科
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