资源类型:
文章类型:
机构:
[1]广州中医药大学第一附属医院检验科 ,广州,510405
[2]南方医科大学南方医院检验医学部 ,广州,510515
[3]广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院检验医学部 ,广州,510120
大德路总院
检验科
大德路总院检验科
广东省中医院
出处:
ISSN:
关键词:
人乳头瘤病毒
宫颈癌
免疫治疗
蛋白表达
摘要:
目的 对人乳头瘤病毒(HPV)16 E7基因中与宿主Rb蛋白结合区域进行突变获得HPV16 E7突变体(HPV16mE7)序列,原核表达获得HPV16mE7蛋白.方法 采用分子克隆技术扩增野生型HPV 16E7基因,设计特异性引物对目的基因进行定点突变并构建表达质粒,转化进入原核表达体系并通过IPTG诱导表达,表达产物大小及纯度经十二烷基硫钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,免疫原性经蛋白免疫印迹法(Western blot)鉴定.结果 准确按照设计突变目的基因特定位点,SDS-PAGE显示获得高纯度目的蛋白,Western blot结果显示目的蛋白具有良好的免疫原性.结论 成功对HPV16 E7进行定点突变并获得纯度较高免疫原性良好的突变表达蛋白.
基金:
创新强院青年科研人才培优项目(2015QN08)
基金编号:
2015QN08
第一作者:
第一作者机构:
[1]广州中医药大学第一附属医院检验科 ,广州,510405
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
张战锋,刘媛瑞,徐建华.HPV16E7基因定向突变及表达产物免疫原性研究[J].检验医学与临床.2019,16(08):1019-1022.