摘要：
目的 运用过氧化氢(H2O2)制作人卵巢颗粒细胞(COV434)氧化应激模型,通过检测氧化应激MAPKs和抗氧化应激Nrf2/ARE通路的变化,探讨COV434氧化应激的机制.方法 研究不同H2O2浓度(0.5、1、1.5 mmol/L)和不同作用时间(1、2、4、6及12 h)梯度下,MAPKs家族中ERK、P38及JNK蛋白及其磷酸化的表达水平,Nrf2/ARE通路中Nrf2、keap1和P62蛋白表达水平.结果 在H2O21.5 mmol/L浓度作用下,COV434细胞内p-ERK、p-P38、p-JNK在1h表达最强;在不同浓度H2O2作用4h后,p-ERK不随浓度的变化而变化,然而p-P38、p-JNK随浓度的增加表达增强;Nrf2蛋白表达随着H2O2作用时间的延长和浓度的增加逐渐增强;Keap1在H2O21.5 mmol/L浓度作用下,随着时间延长蛋白表达轻度下降,而P62的蛋白表达轻度上升;在不同浓度H2O2作用4h下Keap1变化不明显,而P62表达稍微增强.结论 MAPKs 3个亚族均参与了H2O2诱导COV434氧化应激过程,氧化应激可以诱导细胞内Nrf2的蛋白表达,提示Nrf2/ARE通路在COV434自我抗氧化中发挥作用.
