目的：副流感病毒是婴幼儿下呼吸道感染的重要病原体，为快速准确诊断副流感病毒感染，文中探讨一种从鼻拭子快速分离培养及鉴定副流感病毒的方法。方法采集0～5岁诊断为急性呼吸道感染的患儿鼻拭子标本，以3000 r／min离心1 h接种至96孔板预制LLC-MK2细胞以及按照传统培养法进行接种，最后补充含4μg／mL TPCK胰酶的病毒维持培养基。每天观察细胞病变，培养第2、5、8天分别作血吸附、血凝试验，试验阳性时作免疫荧光鉴定。结果从83份鼻拭子标本中分离鉴定6株副流感病毒，阳性率7．2％。离心培养法与传统培养法在标本培养2 d后其分离率分别为7．2％和0，差异有统计学意义（P＜0．05）。阳性标本感染的细胞镜下可见局部变长、融合、破碎的细胞病变，血凝试验4℃凝集而室温不凝集，血吸附试验4℃阳性而室温阴性，免疫荧光可见细胞内特异性苹果绿荧光。结论快速分离培养方法可最快在2d内从鼻拭子标本中获得有毒力和生物活性的副流感病毒并进行鉴定。