资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]510120,广州,广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院)检验科
大德路总院
检验科
广东省中医院
[2]232001,安徽,淮南,安徽理工大学医学院生物工程研究所
出处：
ISSN：
关键词：
腺病毒
胰腺十二指肠同源框1基因
NK6转录因子相关
基因座1
间充质干细胞
摘要：
目的 运用pADxsi系统构建带人PDX1与NKX6.1双基因表达腺病毒载体.方法 采用基因克隆技术,将目的 基因NKX6.1克隆至pShuttle-GFP-CMV中,得到pShuttle- GFP-CMV-NKX6.1;将PDX1克隆至pShuttle-CMV-GFP/CMV-NKX6.1上,替换掉GFP,得到pShuttle-CMV-PDX1/CMV-NKX6.1;将CMV-PDX1/CMV-NKX6.1从pShuttle-CMV-PDX1/CMV- NKX6.1转移到ADxsi骨架载体上,得到pADxsi-CMV-PDX1/CMV-NKX6.1,在293细胞中进行包装与扩增活病毒,病毒滴度测定;体外感染人胎肝间充质干细胞.结果 分别酶切重组人PDX1与NKX6.1基因表达穿梭质粒与腺病毒载体质粒,阳性克隆均获得与理论相一致的目的 条带;重组腺病毒感染人胎肝间充质干细胞比例达90%以上;RT-PCR 结果表明目的 基因在人胎肝间充质干细胞内能稳定表达;免疫细胞化学与间接荧光检测目的 PDX1与NKX6.1蛋白分子均特异在细胞核表达.结论 应用pADxsi系统重组技术成功构建了人PDX1与NKX6.1双基因表达腺病毒载体.
第一作者：
第一作者机构：
[1]510120,广州,广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院)检验科
[2]232001,安徽,淮南,安徽理工大学医学院生物工程研究所
通讯作者：
通讯机构：
[1]510120,广州,广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院)检验科
[2]232001,安徽,淮南,安徽理工大学医学院生物工程研究所
推荐引用方式(GB/T 7714)：
唐小龙,张荣波,汪雪峰,等.PDX1与NKX6.1双基因表达腺病毒载体的构建、鉴定与表达[J].第三军医大学学报.2010,32(04):364-368.
