资源类型：
收录情况：
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型：
机构：
[1]广东医学院衰老研究所,广东东莞523808
[2]广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江524023
[3]广东省中医院检验科,广东广州510120
大德路总院
检验科
广东省中医院
出处：
ISSN：
关键词：
酵母双杂交
A型核纤层蛋白前体
衰老
共定位
摘要：
目的:探讨A型核纤层蛋白前体( prelamin A)在细胞内堆积造成细胞早老的机理,筛选了prelamin A相互作用蛋白并研究其在早老细胞中的表达情况.方法:以prelamin A的C末端区域为诱饵蛋白,采用酵母双杂交方法从人骨骼肌cDNA文库中筛选prelamin A相互作用蛋白.构建了prelaminA识别因子(Narf)与绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP - Narf,与红色荧光蛋白- prelamin A融合表达质粒pDsRed - PLA共转染HEK293细胞,激光共聚焦显微观察共定位情况.Western blotting检测Narf在衰老表型HEK293PLA细胞的表达情况.结果:筛选得到包括Narf在内的7个候选相互作用蛋白.Narf与prelamin A能相互作用并共定位于核纤层,在prelamin A过表达的HEK293PLA细胞中Narf表达没有升高.结论:Narf在细胞内与prelamin A相互作用,且表达量不受后者影响.
基金：
国家自然科学基金(30871440;30900739);广东省自然科学基金(7301506和9252402301000002);广东省高校自然科学研究重点项目(06Z015);广东省医学科研基金(B2007138);东莞市科技计划项目(2008108101062)
第一作者：
第一作者机构：
[1]广东医学院衰老研究所,广东东莞523808
[2]广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江524023
通讯作者：
通讯机构：
[1]广东医学院衰老研究所,广东东莞523808
[2]广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江524023
推荐引用方式(GB/T 7714)：
陈维春,刘振杰,蒋智文,等.Prelamin A相互作用蛋白Narf的鉴定和表达分析[J].生物技术.2011,21(05):22-27.
