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文章类型：
机构：
[1]广东省中医院大学城医院检验科,广东广州510405
大学城医院
检验科
大学城医院检验科
广东省中医院
出处：
ISSN：
关键词：
肺炎链球菌表面蛋白A
肺炎链球菌溶血素
融合蛋白
摘要：
目的 利用基因定点突变技术扩增Ply突变基因△Ply,基因重组技术构建△Ply与PspA基因的串联融合表达蛋白PspA-△Ply.方法 根据肺炎链球菌TIGR4型表面蛋白A和溶血素基因序列设计引物,定点突变法扩增Ply突变基因,PCR法扩增PspA基因.运用基因重组技术构建pET32a-PspA-△Ply表达载体,双酶切与测序验证重组质粒;重组质粒转化人大肠埃希菌BL21(DE3),经不同时间、不同温度、不同浓度IPTG诱导表达融合蛋白,Western免疫印迹鉴定表达产物.结果 Ply突变基因测序证实ply基因的△A146R147碱基成功突变,双酶切与测序证实pET32a-PspA-△Ply构建正确,Western免疫印迹见重组质粒转化菌在120×103现特异性条带.结论 成功实现Ply基因的定点突变,构建PspA-△Ply融合蛋白表达载体,为研究新型抗肺炎链球菌蛋白疫苗奠定基础.
基金：
广东省医学科学技术研究基金(A2007228)
基金编号：
A2007228
第一作者：
第一作者机构：
[1]广东省中医院大学城医院检验科,广东广州510405
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
薛新娜,陈茶,李有强,等.溶血素的定点突变及与表面蛋白A的表达[J].中华医院感染学杂志.2010,20(18):2755-2758.
