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◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]南方医科大学南方医院消化系疾病研究所,广东,广州,510515
[2]广州中医药大学第二附属医院放疗科,广东,广州,510120
广东省中医院
出处：
ISSN：
关键词：
Rac1
RNA干扰
软琼脂单克隆形成
SW480细胞
摘要：
目的 构建针对Rac1的siRNA表达载体,并观察其对大肠癌SW480细胞中Rac1蛋白表达的抑制作用,同时研究Rac1蛋白表达抑制后细胞在体外软琼脂糖中单克隆形成情况.方法 化学合成用于产生针对Rac1的发卡状RNA的寡核苷酸,各64个碱基,退火后插入线性化的pSUPER载体的H1启动子下游.重组载体经限制性酶切和测序.把构建的载体转染大肠癌细胞系SW480,观察其对Rac1蛋白表达的干扰作用,软琼脂糖体外克隆形成实验研究SW480抑制Rac1蛋白表达后的效果.结果 限制性酶切和序列测定表明成功构建了可以表达针对Rac1的发卡状RNA表达载体,该载体表达的发卡状RNA在SW480细胞中能够有效的下调Racl蛋白的表达.体外软琼脂单克隆形成实验显示,抑制Rac1蛋白表达后,形成的单克隆数目明显减少,直径也明显缩小.结论 成功构建了针对Rac1的发卡状RNA表达载体;体外软琼脂单克隆实验表明Rac1蛋白对SW480细胞克隆形成数目及大小有明显影响,说明Rael蛋白在大肠癌的体外生长过程中具有重要作用.
PubmedID：
第一作者：
第一作者机构：
[1]南方医科大学南方医院消化系疾病研究所,广东,广州,510515
推荐引用方式(GB/T 7714)：
南清振,高蕾,肖冰,等.Rac1-siRNA表达质粒的构建及Rac1对SW480细胞单克隆形成的影响[J].南方医科大学学报.2010,30(06):1339-1342.
