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神经元素3 与成对盒基因4 促进胰腺十二指肠同源框蛋白1 诱导间充质干细胞向胰腺分泌细胞分化

[Neurogenin 3 and Paired box gene 4 promote PDX1-induced differentiation of mesenchymal stem cells into pancreatic secretory cells].

文献详情

资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

机构: [1]广东省中医院检验科,广州510120 [2]广州医学院临床技能中心,广州510182
出处:
ISSN:

关键词: 同源盒结构域蛋白质类 间质干细胞 胰腺 成对盒基因4 神经元素3

摘要:
目的:探索神经元素3( neurogenin 3,NGN3) 与成对盒基因4 ( paired box gene 4,PAX4) 对胰腺十二指肠 同源框蛋白1( pancreatic and duodenal homeobox factor 1,PDX1) 驱动间充质干细胞( mesenchymal stem cells,MSCs) 向胰腺β 细胞分化过程中的作用。方法: 构建PDX1 基因及NGN3 与PAX4 双基因表达腺病毒,重组腺病毒Adxsi- CMV-PDX1 感染诱导MSCs1 周后,再行重组腺病毒Adxsi-CMV-NGN3 /CMV-PAX4 感染诱导MSCs; 分别检测PDX1、 PAX4、NGN3、NK 转录因子相关的2. 2( NK transcription factor related,gene family 2,locus2,NKX2. 2) 、v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog B( MafB) 、胰岛素( Insulin) 、胰高血糖素( Glucagon) 多种胰腺分泌细胞相 关分子表达情况。结果: 成功构建腺病毒Adxsi-CMV-PDX1 与Adxsi-CMV-NGN3 /CMV-PAX4; MSCs 经Adxsi-CMVPDX1 与Adxsi-CMV-NGN3 /CMV-PAX4 分步诱导后,免疫细胞化学与间接荧光检测显示PDX1、NGN3 与PAX4 因子 在细胞核内稳定表达; 重组腺病毒稳定转染5 d 后,细胞开始变圆并集聚成团,用双硫腙( dithizone,DTZ) 染色细胞 质呈亮红色; 细胞经诱导1 周后,用RT-PCR 检测到神经源分化因子1 ( neurogenic differentiation 1,NruroD1) 与 NKX2. 2 表达,2 周后可检测胰岛素/胰岛素原分子; 间接荧光检测显示诱导后的细胞先后开始表达NKX2. 2、MafB 等转录因子与胰岛素/胰岛素原、胰高血糖等胰岛分泌细胞相关分子,但未能检测到v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A( MafA) 与C 肽分子表达。结论: NGN3 与PAX4 对PDX1 诱导间充质干细胞向胰腺分泌 细胞分化具有促进作用。

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第一作者:
第一作者机构: [1]广东省中医院检验科,广州510120
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