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收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]广州中医药大学第二临床医学院中心实验室,广东广州510006
广东省中医院
出处：
ISSN：
关键词：
RNA 干扰
基因沉默
Toll 样受体2
膀胱肿瘤
摘要：
目的通过载体表达的RNA 干扰技术（RNAi）阻断小鼠膀胱癌T739 细胞TLR2 基因的表达，建立TLR2 基因稳定
沉默的细胞株。方法构建3 种pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2 重组质粒， 脂质体法转染T739 细胞， 用RT-PCR
法筛选干扰效果最强的重组质粒。再将该重组质粒转染T739 细胞，用杀稻瘟菌素筛选抗性细胞克隆，即获得TLR2 受
体及其mRNA 稳定表达最低的稳转细胞株， 并鉴定其生物学特征。结果测序结果显示设计合成的DNA 片段已正确
插入载体，将沉默效果最强的重组质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2 转染T739 细胞，筛选出有效沉默T739 细
胞TLR2 基因表达的细胞株T739 -TLR2Δ。TLR2 mRNA 和受体表达分别下降95%和90%以上；T739-TLR2Δ 细胞增殖
指数降低、群体倍增时间延长，未发现明显凋亡细胞。结论构建pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2 重组质粒能稳定
抑制T739 细胞TLR2 表达，可用于研究TLR2 基因在T739 细胞的功能与作用。
基金：
国家自然科学基金（30873426）；教育部高等学校博士点科
研基金（200805720010）；广东省中医药科研课题（2009191）
基金编号：
30873426
第一作者：
第一作者机构：
[1]广州中医药大学第二临床医学院中心实验室,广东广州510006
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
危建安,曾星,韩凌,等.TLR2基因稳定沉默膀胱癌细胞株T739-TLR2Δ 建立及生物学特征鉴定[J].Nan fang yi ke da xue xue bao = Journal of Southern Medical University.2010,30(8):
