目的 基于RNA-seq测序结果，探索护阳养坤方（HYYKF）对去氧乙烯基环乙烯（VCD）诱导的人卵巢颗粒细胞（COV434）凋亡的保护作用及可能的机制。方法 根据动物实验RNA-seq测序结果，用实时荧光定量聚合酶链式反应法和蛋白免疫印迹法验证差异富集通路基因和蛋白表达情况；在此基础上，进行体外实验：选用人卵巢颗粒细胞COV434,通过MTT法观察VCD和HYYKF对COV434细胞增殖的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡情况；用蛋白免疫印迹法检测COV434细胞中JNK/p38MAPK/P65 NF-κB信号通路蛋白表达。结果 转录组验证结果提示JNK/p38和P65 NF-κB通路可能参与HYYKF防治大鼠卵巢衰退；体外结果表明HYYKF可以部分减弱VCD诱导的COV434细胞增殖抑制，以2mg/mL作用最显著；与VCD组比较，HYYKF干预可降低VCD诱导COV434细胞凋亡（0.5mg/mL,31%;2.0mg/mL,28%）,VCD显著上调c-Caspase-3的蛋白表达（P(0.05）,与VCD模型组相比较，HYYKF组细胞p-JNK、p-P38及c-Caspase-3的蛋白表达显著下调（P(0.05）。结论 护阳养坤方对卵巢的保护作用与调控JNK/p38/P65 NF-κB通路减少颗粒细胞凋亡有关。