摘要：
背景:自噬可促进低氧环境下肌卫星细胞的存活,然而基于自噬有明显的时效性,不同时间的自噬水平与肌卫星细胞增殖能力间的关系如何未见探讨.目的:探讨不同时间去血清饥饿对大鼠肌卫星细胞增殖能力及自噬微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)及Beclin1表达的变化.方法:原代分离培养雄性SD大鼠(广州中医药大学动物实验中心提供,体质量约120 9)多裂肌卫星细胞,取第3代细胞,培养至对数生长期后,分别设置正常血清组(体积分数10％胎牛血清)、空白血清(仅含培养基,无胎牛血清)6h组、空白血清12h组、空白血清24 h组,CCK-8检测各组细胞的增殖情况,并采用Western-blot法和RT-PCR法检测LC3及Beclin1蛋白及基因的表达.结果 与结论:①细胞增殖能力:空白血清诱导12h后细胞增殖能力较正常血清组及诱导6h时下降(P＜0.01),诱导24 h后细胞增殖能力较诱导12 h下降(P＜0.05);②LC3及Beclin1蛋白及基因的表达:空白血清诱导6h后,LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ及Beclin1蛋白及基因的表达较正常血清组明显升高(P＜0.05),诱导12h及诱导24h后LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ蛋白表达较诱导6h时明显升高(P＜0.01),Beclin1的表达较诱导6h时升高(P＜0.05),LC3及Beclin1基因的表达较6h均升高(P＜0.05);③结果证实,去血清饥饿可以诱导肌卫星细胞发生自噬,自噬在去血清早期(12h内)可保护细胞的增殖能力,12h后细胞可出现过度自噬,不利于细胞的增殖.
