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◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
文章类型：
机构：
[1]深圳市血液中心,广东深圳,518035
深圳市血液中心
深圳医学信息中心
[2]陕西省血液中心
[3]广州中医药大学第二附属医院输血科
大德路总院
输血科
输血科
广东省中医院
出处：
ISSN：
关键词：
单链核苷酸
适配体
次级文库
模板浓度
PCR扩增
双链DNA
摘要：
目的 制备高纯度高浓度的单链核苷酸(ssDNA)适配体次级文库.方法 使用生物素标记的上、下游引物做PCR扩增制备双链DNA(dsDNA);以dsDNA为模板,使用大量无生素标记的上游引物及少量生物素标记的下游引物行不对称PCR扩增制备ssDNA;使用链霉亲和素磁珠去除ssDNA扩增产物中的dsDNA及其他副产物.结果 起始模板浓度在1.13×(105-107)拷贝时,链霉亲和素磁珠去除ssDNA扩增产物中的dsDNA及其他副产品的效果较好;起始模板浓度≥1.13×108拷贝,则仍有较多副产品残留在纯化后的ssDNA产物中.结论 起始模板浓度控制在1.13×105-1.13×107拷贝,应用本方法可获得纯度、产量均较高的ssDNA次级文库.
基金：
深圳市科技计划项目(JCYJ20140403092619633)%
第一作者：
第一作者机构：
[1]深圳市血液中心,广东深圳,518035
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
庄乃保,吴凡,徐华,等.起始模板浓度对单链核苷酸适配体次级文库制备的影响[J].中国输血杂志.2015,28(07):762-765.
