目的:建立研究药物与肠道内P-糖蛋白相互作用的Ussing chamber实验验证模型,并对相关影响因素进行总结.方法:应用Ussing chamber技术评价P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对底物地高辛经肠转运吸收方向(M-S)与分泌方向(S-M)累积透过量、表观渗透系数及外排转运率的影响.采用LC-MS液-质联用法测定样品中地高辛含量,比较抑制剂组与对照组计算结果之间的差异.结合文献分析总结实验过程中相关影响因素.结果:对照组,地高辛经大鼠十二指肠、空肠、回肠及结肠外排转运率分别为3.23±0.73、4.78±0.52、5.18±0.81及2.77±0.20.与对照组相比,浓度为100 μg/ml的维拉帕米减少了地高辛在各肠段的外排转运率,其中空肠(0.73±0.10)与回肠(1.38±0.38)有统计学差异,结肠段无统计学差异.浓度为200 μg/ml的维拉帕米能降低结肠段(1.28±0.30)外排转运率,且有统计学差异.结论:建立了运用Ussing chamber技术研究药物与肠道内P-糖蛋白相互作用的实验验证模型,总结了相关影响因素,为优化实验方案,推进该技术在国内药物肠道转运机制研究领域中的应用提供理论指导.