资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型:
机构:
[1]广州中医药大学第二临床医学院,广州,510120
广东省中医院
[2]广州医科大学附属第一医院检验科,广州,510120
[3]广东省中医院检验科,广州,510120
大德路总院
检验科
广东省中医院
出处:
ISSN:
关键词:
病毒宏基因组
高通量测序
临床诊断
摘要:
目的 以1例恶性胸腺瘤并发外阴部感染患者溃疡部位拭子标本为模型,建立适用于临床病毒检测的宏基因测序平台.方法 提取该患者外阴部水疱液中的全部核酸,通过不依赖序列的单引物扩增(SISPA)后进行Ion Torrent PGM高通量测序,筛选出与病毒相关的测序读长(reads)与NCBI数据库中的序列进行比对,分析标本中病毒核酸的种类及丰度,并与荧光定量PCR法比较.结果 共获得320 049条读长,4 288条(1.3%)与病毒相关,其中2 629条为噬菌体基因,其余1 659条读长中与人类疾病相关的有单纯疱疹病毒2型(HSV-2) 14条(0.84%)、指环病毒属(Anellovirus)1 361条(82.0%)、多瘤病毒属(Polyomavirus)19条(1.14%)、乳头瘤病毒属101(Papillomavirus 101)6条(0.40%),反转录病毒科80条(4.82%)、痘病毒科45条(2.7%)、其他病毒如植物、鱼类、禽类病毒117条(7.05%)、未分类病毒17条(1.02%);疱疹病毒序列鉴定结果表明,14条读长注释为HSV-2(NC_001798),且用荧光定量PCR确认为HSV-2阳性,两法结果一致;噬菌体序列分析发现2 629条读长为噬菌体基因,其中1 251条为肠杆菌噬菌体(占47.6%),1 331条为葡萄球菌噬菌体(占50.6%).结论 初步建立了基于Ion Torrent PGM的病毒宏基因组测序平台并成功检测出HSV-2,为其在临床中的应用提供了实验依据.
基金:
广东省科技计划项目(2011B031800028)%广州中医药大学创新基金(2011KT1812)
基金编号:
2011B031800028
第一作者:
第一作者机构:
[1]广州中医药大学第二临床医学院,广州,510120
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
罗娅莎,林勇平,宋金龙,等.病毒宏基因组高通量测序在临床感染性疾病诊断中的应用[J].临床检验杂志.2014,32(12):903-905.