目的 通过对影响α-淀粉酶参考方法测量准确性的主要因素进行探讨,以帮助参考实验室更好地建立和运行该参考方法.方法 在其他因素不变的条件下,只改变实验中的一个因素,检测2009A,2009B(指2009年RELA样本,下同)各10次,计算其与原方法检测结果的相对偏倚及统计学意义(允许偏倚范围设定为参考方法等效限的1/4,即±1.25%).主要探讨的影响因素有:a.反应液和样本加入步骤:a1.反应液和样本分步加入;a2.反应液和样本同时加入.b.加样方式:b1.手工加样,加样前润洗移液器,加样后不洗;b2.手工加样,加样前、后均不润洗移液器;b3.手工加样,加样前不洗,加样后回洗移液器;b4.稀释配液仪加样.c.混匀方式:c1.反应全程不搅拌;c2.搅拌至反应延迟时间(delay time)的2/3时停止;c3.反应全程搅拌.d.α-葡萄糖苷酶浓度:反应液中溶液2和α-葡萄糖苷酶(活性为1 014 ku/L)的比例为d1 100:1,d2 100:0.5,d3 100:0.8和d4 100:1.2.e.调节起始试剂pH方式:e1.静止条件下达到方法要求;e2.搅拌条件下达到方法要求.结果 ①a2,b1,c1,d4方法检测样本(2009A,2009B,下同)结果,相对偏倚为-0.44%～0.40%(t=-1.00～4.45,P值均＞0.05,差异均无统计学显著性意义).②b2,b3和c3方法检测结果的相对偏倚为-2.14%～17.0%(t=-37.21～26.50,P值均＜0.05,差异均有统计学显著性意义).③d2,d3方法检测两样本结果的相对偏倚为-0.47%～-0.04%(t=1.191～12.92,2009A样本结果P值均＞0.05,差异无统计学显著性意义,2009B样本结果P均＜0.05,差异有统计学显著性意义).④e2方法检测两样本结果的相对偏倚为-0.48%和0.11%(t=2.523,1.728,2009A样本P值＜0.05,差异有统计学显著性意义,2009B样本P值＞0.05,差异无统计学显著性意义).结论 通过对实验中常见影响因素的分析,优化了方法步骤,对参考方法的建立和运用具有一定的实用价值.