资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ CSCD-E
文章类型：
机构：
[1]广东省中医院检验医学部,广东省广州市,510120
大德路总院
检验科
大德路总院检验科
广东省中医院
[2]广东药学院药用生物活性物质研究所,广东省生物活性药物研究重点实验室,广东省广州市,510006
出处：
ISSN：
关键词：
短发夹RNA
survivin 基因
前列腺癌细胞
载体
凋亡
组织构建
摘要：
背景:survivin 基因特异性表达于肿瘤和胚胎组织,与肿瘤细胞的分化增殖、浸润转移以及多药耐药密切相关.目的:构建靶向survivin 基因的shRNA 重组质粒表达载体,转染前列腺癌细胞PC3,验证该载体能否下调细胞survivin 基因mRNA 水平.方法:以survivin 基因为靶点设计具有短发夹结构的shRNA 序列,经退火成互补双链后克隆入pENTR/U6 建立重组表达载体pENTR/U6-SUR ;转化E.coli TOP10 菌株,挑取阳性菌落进行菌落PCR 和测序鉴定;将重组质粒转染前列腺癌细胞株PC3 细胞,RT-PCR 检测重组质粒对细胞survivin 基因mRNA 水平的抑制效果.结果与结论:将设计合成的shRNA 序列经退火后克隆至pENTR/U6 载体中,菌落PCR 可扩增出目的条带,测序结果证实插入片段为所需序列;pENTR/U6-SUR 重组质粒转染后PC3 细胞survivin 基因mRNA 表达水平显著下降,且24 h 比48 h 作用更明显.成功构建了靶向survivin 基因的shRNA 质粒表达载体,并证实该载体显著下调了PC3 细胞中survivin 基因mRNA 水平.
基金：
广东省科技计划项目(2011B031800207)%广东省医学科学技术研究基金(A2008240)%广东省中医院青年后备人才科研项目(E206001)
基金编号：
2011B031800207
第一作者：
第一作者机构：
[1]广东省中医院检验医学部,广东省广州市,510120
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
徐建华,陈丹娜,何敏,等.构建survivin shRNA重组载体及靶向下调PC3细胞survivin mRNA的表达[J].中国组织工程研究与临床康复.2011,15(41):7738-7741.
