资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型:
机构:
[1]广东省中医院检验科,广州,510120
大德路总院
检验科
广东省中医院
[2]广东药学院基础医学院,广州,510006
[3]广东医学院病原生物学教研室,广东湛江,524023
出处:
ISSN:
关键词:
抗菌肽
真核表达
中国仓鼠卵巢细胞
Attacin
摘要:
目的 克隆家蝇幼虫抗菌肽Attacin-His_6融合基因,构建真核表达载体并转染CHO细胞表达,为深入研究其生物学活性创造条件.方法 以pUCm-T/Attacin载体为模板,用含6×His标签序列的下游引物克隆Attacin-His_6融合基因,并将其构建于pcDNA3.1(+)中,pcDNA3.1/Attacin-His_6重组质粒转染CHO细胞,Zeocin G418筛选阳性细胞株,RT-PCR检测重组质粒在CHO细胞的转录情况.结果 成功扩增出Attacin-His_6融合基因,构建了pcDNA3.1/Attacin-His_6重组质粒并转染入CHO细胞中,RT-PCR从阳性克隆的CHO细胞中扩增出预期大小的目的 片段,从转录水平证实CHO-Attacin-His_6重组细胞株表达了Attacin-His_6基因.结论 抗菌肽Attacin基因哺乳动物型工程细胞表达系统的建立,为进一步制备其肽类抗生素奠定了基础.
基金:
国家自然科学基金(30671832)%广东省科技厅科技计划(2003B31602)%广东省广州市科技攻关项目(2005Z3-E0211)
基金编号:
30671832
第一作者:
第一作者机构:
[1]广东省中医院检验科,广州,510120
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
徐建华,朱家勇,金小宝,等.多聚组氨酸标签的Attacin抗菌肽基因克隆及其在CHO细胞中稳定表达[J].广东医学.2007,28(12):1910-1913.