摘要：
背景:生长相关蛋白43是一种与轴突生长相关的蛋白,在促进神经发育、轴突再生、突触生长、结构与功能重建等方面起关键作用;研究发现中药环维黄杨星D对实验性脑缺血再灌注大鼠脑损伤有一定保护作用.目的:观察高血压脑缺血再灌注大鼠生长相关蛋白43 mRNA表达情况及中药环维黄杨星D的影响.设计:随机对照动物实验.单位:佛山市中医院,广东省中医院中心实验室.材料:环维黄杨星D是从中药黄杨宁中提取的生物碱单体,环维黄杨星D粉剂由南京小营药制药厂生产提供,国家中药保护品种号ZYB20796057.SD大鼠120只,清洁级雄性,鼠龄两三个月,体质量90～120 g.方法:实验于2005-06/2006-03在佛山市中医院、广东省中医院中心实验室完成.①双肾双夹法建立易卒中型肾血管性高血压大鼠模型,120只大鼠随机分为不施任何处理的肾血管性高血压大鼠空白组20只、仅作手术创伤的假手术组20只、脑缺血再灌注模型组40只和环维黄杨星D治疗组40只.②线栓法复制一侧大脑中脉闭塞脑缺血-再灌注模型,环维黄杨星D治疗组在缺血2 h再灌注后分别每天腹腔注射环维黄杨星D 6.48 mg/kg加生理盐水1.5 mL,2次/d;对照组中的各小组则同步腹腔注射生理盐水2 mL/次,用法同治疗组;各组每天两次注射时间相隔7 h.各组分别在缺血再灌注第1,7,14,30 d处死.③制作脑片,用原位杂交检测不同时间点各组大鼠脑生长相关蛋白43 mRNA表达.主要观察指标:①脑缺血再灌注2h后,缺血区周围生长相关蛋白43 mRNA表达情况.②脑缺血再灌注2 h后海马区生长相关蛋白43 mRNA表达.结果:120只大鼠全部进入结果分析.①生长相关蛋白43 mRNA免疫原位杂交结果:各组大鼠脑内海马结构,可以检测到表达较弱的生长相关蛋白43 mRNA的阳性细胞,脑缺血再灌注后血肿周围缺血半暗区表达丘脑生长相关蛋白43 mRNA的阳性表达细胞.②脑缺血再灌注后血肿周围生长相关蛋白43 mRNA表达情况:在空白组、假手术组未见阳性细胞;缺血再灌注后模型组1 d出现血肿周围缺血半暗区生长相关蛋白43 mRNA阳性细胞,7 d明显增多,14 d逐渐减少,30 d仍有表达但明显减少,各时间点表达差异有显著性(P＜0.01);环维黄杨星D治疗组血肿周围生长相关蛋白43 mRNA阳性表达细胞在各时间点较模型组多,差异有显著性(P＜0.05).③脑缺血再灌注后大鼠海马区生长相关蛋白43 mRNA表达情况:空白组与假手术组比较差异无显著性;模型组自造模后,1 d可见海马区较多的生长相关蛋白43 mRNA阳性细胞,7 d达到高峰,14 d后逐渐下降,30 d表达明显减少,但仍较假手术组明显多;环维黄杨星D治疗组海马区生长相关蛋白43 mRNA阳性细胞在各个时间点均比模型组多,差异有显著性(P＜0.01).结论:环维黄杨星D上调实验性脑缺血再灌注大鼠脑生长相关蛋白43mRNA的表达,可能与促进轴突的再生有关.
