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◇ 北大核心
文章类型：
机构：
[1]南方医科大学南方医院,中医科,广东,广州,510515
[2]广东省中医院,内二科,广东,广州,510105
广东省中医院
[3]南京军区总医院,中医科,江苏,南京,210002
[4]南方医科大学南方医院,内分泌科,广东,广州,510515
出处：
ISSN：
关键词：
糖尿病
肾阳虚证
抑制性消减杂交
基因组消减文库
摘要：
目的:运用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建糖尿病(Diabetic mellitus,DM)肾阳虚证DNA消减文库.方法:选择汉族中医辨证为肾阳虚证的DM患者以及正常人做对照组,进行正向和反向消减杂交.用Rsa Ⅰ酶切用硅胶法抽提基因组DNA成大小不等的片段,分别连接两种不同的接头,进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将PCR产物与U/A载体连接,经蓝白斑筛选及菌液PCR筛选出阳性重组质粒,构建DM肾阳虚证DNA消减文库.结果:用SSH方法筛选出DM肾阳虚证的差异DNA片段,经克隆及PCR筛选出阳性重组质粒,从而成功地构建了DM肾阳虚证的DNA消减文库.结论:SSH技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建DM肾阳虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆DM肾阳虚证相关基因奠定了基础.
基金：
中国科学院资助项目(30271573,30472118)%国家中医药管理局科研项目(02-03JP43)%广东省科技计划(2003B31712)
第一作者：
第一作者机构：
[1]南方医科大学南方医院,中医科,广东,广州,510515
推荐引用方式(GB/T 7714)：
崔丽娟,赵晓山,罗仁,等.运用抑制性消减杂交技术构建糖尿病肾阳虚证DNA消减文库[J].中国中医基础医学杂志.2006,12(3):192-194.
