摘要：
目的:采用抑制性消减杂交技术(Suppression subtractive hybridization, SSH)构建狼疮性肾炎(lupus nephritis, LN)肾阴虚证DNA消减文库.方法:选择汉族人LN中医辨证为肾阴虚证患者以及正常人作为其对照组,用硅胶法抽提血白细胞DNA,经过酶切、接头连接、两次抑制性消减杂交及抑制、巢式PCR后,将PCR产物与A载体连接,经蓝白斑筛选,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建LN肾阴虚证DNA消减文库.结果:用SSH方法筛选出了LN肾阴虚证的差异DNA片段,得到581个白色克隆,再经PCR方法快速筛选出阳性重组质粒,从而成功地构建了DN肾阳虚证的DNA消减文库.结论:SSH技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建LN肾阴虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆LN肾阴虚证相关基因奠定了基础,亦为寻找肾虚证相关基因提供重要线索.
