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不同方法提取SD大鼠膝关节软骨组织的总RNA

Different methods to extract total RNA from the knee cartilage tissue of sprague-dawley rats

文献详情

资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ CSCD-E

机构: [1]深圳市中医院,广东省深圳市518000 [2]广东省中医院骨三科,广东省广州市510120
出处:
ISSN:

关键词: 组织构建 软骨组织构建 软骨 RNA 提取 大鼠 国家自然科学基金

摘要:
背景:目前文献报道的软骨RNA 提取有多钟方法,国内文献报道多为经典Trizol 法,在实验中发现该方法提 取的RNA 并不能满足后续实验的需要。 目的:探索不同方法提取SD 大鼠软骨组织总RNA 的区别。 方法:选取3 月龄SD 大鼠9 只,分别采用Rneasy Lipid Tissue Kit、RNAout 试剂盒和经典Trizol 法对软骨组织 进行总RNA 提取,并通过RNA 琼脂糖凝胶电泳检测RNA 的完整性,以探寻软骨总RNA 最佳提取方案。 结果与结论:Trizol 法提取的RNA A260/A280 值为1.58,说明纯度不高;RNAout 法提取的RNA,由于软 骨含有大量的蛋白多糖和胶原,也不能满足后续实验的需要;RNeasy® Mini Kit 法和肝(Trizol)法提取RNA 的A260/A280 值分别为2.00 和1.98,说明提取的总RNA 或核酸的纯度高。RNA 的完整性电泳结果显示, RNeasy® Mini Kit 法、RNAout 法和肝(Trizol)法可见28 s、18 s 及5 s 条带,而Trizol 法未见任何条带, RNAout 法28 s 和18 s 条带不清楚。结果提示Rneasy Lipid Tissue Kit 法获得的总RNA 纯度高、完整性 和稳定性好,并能成功反转录合成双链cDNA,而RNAout 试剂盒和经典Trizol 法获得的总RNA 不能满 足后续实验需要。

基金:
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第一作者:
第一作者机构: [1]深圳市中医院,广东省深圳市518000
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资源点击量:2018 今日访问量:0 总访问量:645 更新日期:2024-07-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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