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◇ 统计源期刊
◇ CSCD-E
文章类型:
机构:
[1]深圳市中医院,广东省深圳市518000
深圳市中医院
深圳医学信息中心
[2]广东省中医院骨三科,广东省广州市510120
大德路总院
骨科
大德路总院骨三科
广东省中医院
出处:
ISSN:
关键词:
组织构建
软骨组织构建
软骨
RNA 提取
大鼠
国家自然科学基金
摘要:
背景:目前文献报道的软骨RNA 提取有多钟方法,国内文献报道多为经典Trizol 法,在实验中发现该方法提
取的RNA 并不能满足后续实验的需要。
目的:探索不同方法提取SD 大鼠软骨组织总RNA 的区别。
方法:选取3 月龄SD 大鼠9 只,分别采用Rneasy Lipid Tissue Kit、RNAout 试剂盒和经典Trizol 法对软骨组织
进行总RNA 提取,并通过RNA 琼脂糖凝胶电泳检测RNA 的完整性,以探寻软骨总RNA 最佳提取方案。
结果与结论:Trizol 法提取的RNA A260/A280 值为1.58,说明纯度不高;RNAout 法提取的RNA,由于软
骨含有大量的蛋白多糖和胶原,也不能满足后续实验的需要;RNeasy® Mini Kit 法和肝(Trizol)法提取RNA
的A260/A280 值分别为2.00 和1.98,说明提取的总RNA 或核酸的纯度高。RNA 的完整性电泳结果显示,
RNeasy® Mini Kit 法、RNAout 法和肝(Trizol)法可见28 s、18 s 及5 s 条带,而Trizol 法未见任何条带,
RNAout 法28 s 和18 s 条带不清楚。结果提示Rneasy Lipid Tissue Kit 法获得的总RNA 纯度高、完整性
和稳定性好,并能成功反转录合成双链cDNA,而RNAout 试剂盒和经典Trizol 法获得的总RNA 不能满
足后续实验需要。
第一作者:
第一作者机构:
[1]深圳市中医院,广东省深圳市518000
推荐引用方式(GB/T 7714):
孙志涛,牛 维,何升华,等.不同方法提取SD大鼠膝关节软骨组织的总RNA[J].中国组织工程研究.2014,18(51):8201-8205.