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DNA 甲基化检测中亚硫酸氢盐修饰方法的改进与评价

[Improvement and Evaluation on Bisulfite Modification of DNA for DNA Methylation Detection].

文献详情

资源类型:
Pubmed体系:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

机构: [1]南阳理工学院张仲景国医学院,河南南阳473004 [2]南阳市第一人民医院神经内科,河南南阳473000 [3]中山大学达安基因股份有限公司,广东广州510080
出处:
ISSN:

关键词: DNA 甲基化 表观遗传学 亚硫酸氢盐测序 DNA 修饰

摘要:
目的: 建立一种快速便捷的亚硫酸氢盐修饰DNA 方法用于DNA 甲基化检测。方法: 提高亚硫酸氢盐浓度 及修饰温度、缩短修饰时间并用玻璃奶回收DNA 改进DNA 修饰方法,用亚硫酸氢盐测序法分析MAGE-A3 基因和 DAP-K 基因目的片段中胞嘧啶转化为胸腺嘧啶的效率,评价改进方法与传统方法、试剂盒方法对DNA 的修饰效果。 结果: 改进的方法可将操作过程缩短到3 h 左右; 非甲基化的胞嘧啶到胸腺嘧啶的转化率超过99%,与传统方法、试 剂盒方法相比差异无统计学意义( χ2 = 0. 0564,P > 0. 05) ; 只针对非甲基化的胞嘧啶进行转化修饰,而在对甲基化胞 嘧啶过度修饰为胸腺嘧啶方面与传统方法无统计学差异( χ2 = 0. 0149,P > 0. 05) 。结论: 改进的亚硫酸氢盐DNA 修 饰方法修饰效率高,对甲基化的胞嘧啶过度修饰影响不显著,且具有节省时间,操作简便等优点。

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第一作者:
第一作者机构: [1]南阳理工学院张仲景国医学院,河南南阳473004
通讯作者:
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资源点击量:2018 今日访问量:0 总访问量:645 更新日期:2024-07-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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