目的 :通过构建含CD/TK双自杀基因的重组腺病毒 ,探讨治疗肝细胞癌的途径。方法 :目的基因CD/TK ,自真核载体 pCEA CD/TK中切出 ,亚克隆至腺病毒穿梭质粒中 ,构建成转移质粒pAdtrack CMV CD/TK ,经PmeⅠ酶切后与 pAdeasy 1质粒混匀共转化细菌BJ5 183,挑选克隆pAd CD/TK ,经PacⅠ酶切后转染 2 93细胞 ,PCR鉴定后 ,在人肝癌细胞中测定其感染效率并观察其体外对人肝癌细胞的作用。结果 :pAdtrack CMV CD/TK和 pAd CD/TK经酶切鉴定正确 ,pAd CD/TK转染2 93细胞 ,制备腺病毒后 ,发现其对人肝癌细胞有较高的感染效率 ,给予氟胞嘧啶后 ,发现被感染细胞能够被杀死 ,并具有很高的旁观者效应。结论 :构建的含CD/TK双自杀基因的重组腺病毒对人肝癌细胞有较高的感染效率 ,在体外观察到对人肝癌细胞有较好的杀灭作用