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miRNA-140靶向结合自噬相关基因ULK1的验证

Validation of mirna-140 targeting autophagy-related gene uncoordinated 51 like kinase-1

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心

机构: [1]广州中医药大学附属广东省第二中医院骨科,广东省广州市510095 [2]广东省中医药工程技术研究院/广东省中医药研究开发重点实验室,广东省广州市510095
出处:
ISSN:

关键词: miRNA-140 ULK1 基因 软骨 自噬 凋亡 点突变 组织工程 骨关节炎 质粒 载体 转染 双荧光素酶报告法

摘要:
背景:自噬可以通过抑制凋亡来缓解膝骨关节炎,miR-140 是否可以调节自噬关键基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激 酶-失调51 样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)基因未见报道。 目的:探索miRNA-140 对ULK1 基因的调控关系。 方法:通过miRNA 靶基因预测网站预测ULK1 基因是否为miRNA-140 的靶基因;将ULK1 基因的3'端非翻 译区全长序列载入海肾荧光素酶基因的下游,通过构建结合位点的突变序列,得到野生型和突变型载体,分 别用野生型和突变型海肾荧光素酶载体转染293T 细胞,检测每种转染细胞海肾荧光素酶的表达活性;运用 miRNA-140 inhibitor 对293T 细胞进行干预,Western blot 检测ULK1 蛋白表达水平。 结果与结论:与野生型载体组细胞相比,加入miR-140 mimics 后荧光素酶的表达活性明显降低(P < 0.01); 当抑制miRNA-140 后,ULK1 蛋白的表达明显升高(P < 0.01)。结果证实,miRNA-140 可以与ULK1 基因靶 向结合从而调控其表达。

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第一作者:
第一作者机构: [1]广州中医药大学附属广东省第二中医院骨科,广东省广州市510095
通讯作者:
通讯机构: [1]广州中医药大学附属广东省第二中医院骨科,广东省广州市510095 [*1]广州中医药大学附属广东省第二中医院骨科,广东省广州市510095
推荐引用方式(GB/T 7714):

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