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◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
文章类型:
机构:
[1]广州中医药大学附属广东省第二中医院骨科,广东省广州市510095
[2]广东省中医药工程技术研究院/广东省中医药研究开发重点实验室,广东省广州市510095
出处:
ISSN:
关键词:
miRNA-140
ULK1 基因
软骨
自噬
凋亡
点突变
组织工程
骨关节炎
质粒
载体
转染
双荧光素酶报告法
摘要:
背景:自噬可以通过抑制凋亡来缓解膝骨关节炎,miR-140 是否可以调节自噬关键基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激
酶-失调51 样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)基因未见报道。
目的:探索miRNA-140 对ULK1 基因的调控关系。
方法:通过miRNA 靶基因预测网站预测ULK1 基因是否为miRNA-140 的靶基因;将ULK1 基因的3'端非翻
译区全长序列载入海肾荧光素酶基因的下游,通过构建结合位点的突变序列,得到野生型和突变型载体,分
别用野生型和突变型海肾荧光素酶载体转染293T 细胞,检测每种转染细胞海肾荧光素酶的表达活性;运用
miRNA-140 inhibitor 对293T 细胞进行干预,Western blot 检测ULK1 蛋白表达水平。
结果与结论:与野生型载体组细胞相比,加入miR-140 mimics 后荧光素酶的表达活性明显降低(P < 0.01);
当抑制miRNA-140 后,ULK1 蛋白的表达明显升高(P < 0.01)。结果证实,miRNA-140 可以与ULK1 基因靶
向结合从而调控其表达。
基金:
国家中医药管理局重点专科建设项目(粤中医[2012]7 号);广东省自然科学基金(2014A030310128);广东省
中医优势病种突破项目(粤中医函[2015]19 号);广东省中医药局科研项目(20164002,20172008,20171023)
第一作者:
第一作者机构:
[1]广州中医药大学附属广东省第二中医院骨科,广东省广州市510095
通讯作者:
通讯机构:
[1]广州中医药大学附属广东省第二中医院骨科,广东省广州市510095
[*1]广州中医药大学附属广东省第二中医院骨科,广东省广州市510095
推荐引用方式(GB/T 7714):
卢岩岩,姚 楠,许学猛,等.miRNA-140靶向结合自噬相关基因ULK1的验证[J].Chinese Journal of Tissue Engineering Research.2018,22(24):