摘要:
目的:从小鼠小胶质瘤细胞(BV2)极化角度探索片仔癀(PTH)的抗炎作用机制.方法:将对数生长期的BV2细胞分为空白组,M1模型组[脂多糖(LPS) 100 μg·L-1+干扰素-γ(IFN-γ)10 μg·L-1],M1片仔癀组[LPS 100 μg·L-1+IFN-γ 10μg·L-1+PTH 0.4 g·kg-1],M2模型组[白细胞介素4(IL-4) 20 μg· L-1],M2片仔癀组[IL-4 20 μg·L-1 +PTH0.4 g·kg-1],给以相应处理.通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),一氧化氮(NO),白细胞介素-10 (IL-10),转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中一氧化氮诱导合酶(iNOS),精氨酸-1(Arg-1) mRNA的水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中iNOS,p-STAT1,p-STAT3,Arg-1,p-STAT6蛋白表达情况.结果:与空白组比较,M1模型组上清TNF-α,NO含量显著升高(P<0.01),细胞iNOS mRNA,iNOS,p-STAT1,p-STAT3蛋白水平显著升高(P<0.01),而与M1模型组比较,M1片仔癀组上清TNF-α及NO的含量显著下调(P<0.01),细胞iNOS mRNA显著下调(P<0.01),iNOS,p-STAT1,p-STAT3蛋白水平也明显下调(P <0.05,P<0.01).与空白组比较,M2模型组细胞培养上清中IL-10及TGF-β1含量显著升高(P<0.01),细胞Arg-1 mRNA,Arg-1,p-STAT6蛋白水平显著升高(P<0.01).与M2模型组比较,M2片仔癀组上清中IL-10及TGF-β1含量明显上调(P <0.05,P<0.01),细胞Arg-1mRNA水平,Arg-1及p-STAT6蛋白水平明显上调(P <0.05,P<0.01).结论:片仔癀可以通过调节BV2的极化发挥抗炎作用.