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弹回引物鉴定军团菌属与嗜肺军团菌

A snapback primer mediated one-step PCR assay for the identification of Legionella and Legionella pneumophila strains

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

机构: [1]天津医科大学医学检验学院,300203 [2]广东省中医院检验科 [3]广州金域医学检验中心有限公司,510330
出处:
ISSN:

关键词: 军团菌 嗜肺军团菌 弹回引物 荧光PCR

摘要:
目的:设计一种弹回引物荧光PCR方法鉴定军团菌属和嗜肺军团菌。方法通过分析军团菌16S rRNA基因序列,采用生物信息学方法设计引物,优化实验条件,对方法的特异性、灵敏度进行评估,并对186株环境军团菌分离株与15份环境水样进行鉴定。结果经弹回引物检测,军团菌属菌株在85℃~86℃处有扩增子熔解峰,嗜肺军团菌在71℃处有探针结合区熔解峰,非军团菌未检测到熔解峰。弹回引物对标准菌株DNA与模拟水样灵敏度分别为1 ng/μl与(1×103~1×104)/ml。弹回引物对环境分离株验证实验中,成功鉴定了186株军团菌和44株嗜肺军团菌;对15份环境水样直接检测,检出12份军团菌属阳性水样与4份嗜肺军团菌阳性水样。结论弹回引物荧光PCR方法可用于军团菌属和嗜肺军团菌的鉴定,具有较高的特异性与灵敏度。

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第一作者:
第一作者机构: [1]天津医科大学医学检验学院,300203
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资源点击量:2018 今日访问量:0 总访问量:645 更新日期:2024-07-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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