资源类型：
文章类型：
机构：
[1]广东医学院生物化学与分子生物学教研室,广东东莞,523808
[2]广东医学院药理学教研室
[3]广东医学院衰老研究所
[4]广东省中医院检验科
大德路总院
检验科
广东省中医院
出处：
ISSN：
关键词：
C11orf17
原核表达
生物信息学
摘要：
目的 利用基因工程技术获取原核表达的C11orf17蛋白,结合生物信息学初步预测其功能. 方法 以K562细胞的cDNA为模板,PCR扩增C11orf17的基因序列;双酶切后将目的基因亚克隆至原核表达载体pET-32a上,将测序正确的重组表达质粒pET-32a-C 11 orf17转化到E.coli BL21,经诱导后SDS-PAGE及Western blot 检测融合蛋白表达,并分析其可溶性.采用UGET软件预测C11orf17共表达基因,蛋白质互作数据库挖掘C11orf17基因已知互作蛋白,在线软件Gather富集共表达基因生物功能. 结果 成功构建重组表达质粒pET-32a-C11orf17,此重组体经诱导后能在E.coli BL21高效表达C11orf17的融合蛋白,UGET分析C11orf17前300共表达探针中,包含267个已知基因,共表达基因主要富集细胞交流、信号传导、细胞周期基因功能本体.蛋白互作数据库表明,C11orf17与PRKACA蛋白互作,后者为细胞周期调控重要分子. 结论 在原核细胞中成功表达出C11orf17蛋白,生物信息预测其可能是细胞周期调控重要新分子,为后续研究提供了方向和线索.
基金：
国家自然科学基金(30871440)%广东省自然科学基金重点项目(9252402301000002)%湛江市科技计划项目(2010C3106003)%广东医学院科研基金面上项目(M2010005)
第一作者：
第一作者机构：
[1]广东医学院生物化学与分子生物学教研室,广东东莞,523808
通讯作者：
通讯机构：
[1]广东医学院生物化学与分子生物学教研室,广东东莞,523808
[3]广东医学院衰老研究所
推荐引用方式(GB/T 7714)：
汪宗桂,左长清,刘振杰,等.C11orf17蛋白的原核表达及功能预测[J].中南医学科学杂志.2014,42(06):541-544+553.
