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机构：
[1]南方医科大学南方医院中医科,广东省,广州市,510515
[2]广州中医药大学附属广东省中医院内二科,广东省,广州市,5105153
大德路总院
内科
内二科病房
广东省中医院
[3]南方医科大学南方医院生殖中心,广东省,广州市,510515
出处：
ISSN：
关键词：
肾阴虚
杂交
基因文库
摘要：
目的:采用抑制性消减杂交技术构建汉族人亚健康状态肾阴虚证DNA消减文库.方法:实验于2004-02在南方医科大学南方医院糖尿病分子实验室完成.样本来源于南方医科大学南方医院汉族亚健康且中医辨证为肾阴.虚证的患者1例及健康自愿者1名作为其对照组.用硅胶法抽提血白细胞DNA,用RsaI酶切基因组DNA成大小不等的片段,分别与两种不同的接头连接,进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应,将聚合酶链反应产物与U载体连接,经蓝白斑筛选后,再用聚合酶链反应方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建亚健康肾阴虚证DNA消减文库.结果:用抑制性消减杂交方法筛选出了亚健康肾阴虚证的差异DNA片段,得到680个白色克隆,随机调取96个白色克隆,再经聚合酶链反应方法快速筛选出阳性重组质粒91个,从而成功地构建了亚健康肾阴虚证的DNA消减文库.结论:抑制性消减杂交技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建亚健康肾阴虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆亚健康肾阴虚证相关基因奠定了基础.
基金：
国家自然科学基金资助(30278261,30472118)*;广东省科技计划资助
( 2003B31712, 2004A30103010)
第一作者：
第一作者机构：
[1]南方医科大学南方医院中医科,广东省,广州市,510515
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
代方国,赵晓山,罗仁,等.构建中国汉族人亚健康状态肾阴虚证的DNA消减文库[J].中国临床康复.2005,9(19):97-99.
