目的探讨二仙汤对过氧化氢（H2O2）诱导人卵巢颗粒细胞（COV434）氧化损伤的保护作用及其可能机制。方法体外培养COV434细胞,0.5 mmol/L H2O2诱导COV434氧化损伤。将细胞分为空白组、模型组（H2O2 0.5 mmol/L）、二仙汤水提液低、中、高剂量组（0.5、1、5 mg/mL+H2O2 0.5 mmol/L）。MTT分析细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧族（ROS）水平,微量酶标法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的释放。Annexin V-FITC/PI双染和PI染色,分别检测细胞凋亡和周期。Western blot检测HO-1、NQO-1、P-JNK、P-44/42、P-p38、Bax、Bcl-2、Caspase-9蛋白表达。结果与空白组比较,模型组细胞存活率下降,ROS及LDH水平增加,S期百分率、早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡比例显著增高（P(0.01）,Bax、Caspase-9及P-JNK蛋白表达升高（P(0.05）。与模型组比较,二仙汤水提液低、中、高剂量组LDH、S期百分率降低,G2/M期百分率升高（P(0.05）,二仙汤水提液中、高剂量组细胞存活率升高,ROS释放量、早期凋亡及总凋亡比例降低（P(0.05,P(0.01）,二仙汤水提液低、中剂量组P-44/42蛋白表达升高（P(0.05）。结论二仙汤在一定剂量范围内对H2O2诱导的COV434细胞损伤具有明显的保护作用,其保护效应可能与清除ROS,减轻DNA氧化损伤,调控MAPK-Nrf2信号通路及线粒体通路介导的细胞凋亡有关。