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重组登革病毒包膜蛋白第Ⅲ结构域抑制登革病毒感染的研究

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机构: [1]广东省佛山市顺德区勒流医院检验科 ,广东佛山,528322 [2]广州中医药大学第二临床医学院医学检验部 ,广东广州,510120
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关键词: 登革病毒 包膜蛋白第Ⅲ结构域 原核表达

摘要:
目的 通过原核基因工程技术获得登革2型病毒(DENV2)包膜蛋白第Ⅲ结构域(EDⅢ)重组蛋白,检测其抑制登革病毒感染细胞的效率.方法 利用聚合酶链反应技术扩增DENV2编码EDⅢ重组蛋白的基因片段,构建pET28b(+)-EDⅢ原核表达载体并在大肠埃希菌中诱导EDⅢ重组蛋白表达,进行质谱鉴定.将登革病毒感染VeroE6细胞(经EDⅢ重组蛋白孵育),根据空斑减少数量计算EDⅢ重组蛋白对登革病毒感染的抑制率.结果 成功表达并纯化EDⅢ重组蛋白.EDⅢ重组蛋白可以抑制登革病毒感染的VeroE6细胞,且抑制率与蛋白水平呈正相关,当蛋白水平为100μg/mL时,病毒抑制率为90.5%.结论 DENV2 EDⅢ重组蛋白能够抑制DEN V2吸附和感染细胞,为以EDⅢ重组蛋白为靶标研制药物和疫苗提供重要的实验基础.

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第一作者:
第一作者机构: [1]广东省佛山市顺德区勒流医院检验科 ,广东佛山,528322
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