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◇ 统计源期刊
文章类型：
机构：
[1]广州医科大学附属第一医院检验科,广东广州,510120
[2]广州中医药大学第二临床医学院,广东广州,512120
广东省中医院
[3]广州医科大学金域检验学院,广东广州,510182
出处：
ISSN：
关键词：
登革2型病毒
NS2BH-NS3pro
原核表达
蛋白酶活性
摘要：
目的 通过原核表达获得登革2型病毒NS2BH-NS3pro重组蛋白,并对其蛋白酶活性进行初步研究.方法 通过引入G4TG4连接臂,利用重叠PCR扩增登革2型病毒NS2BH和NS3pro基因序列,构建pET-28b-NS2BH-G4TG4-NS3pro蛋白酶复合物原核表达载体,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对纯化后重组蛋白进行鉴定,FRET技术检测其蛋白酶活性.结果 成功构建pET-28b-NS2BH-G4TG4-NS3pro原核表达载体,获得与预期分子量大小相符且纯度较高的可溶性蛋白,质谱分析表明重组蛋白为登革2型病毒NS2BH-NS3pro蛋白酶复合物,具有较高的蛋白酶活性.结论 基因工程技术获得的NS2BH-G4TG4-NS3pro重组蛋白为后续登革病毒蛋白酶适配体抑制剂的筛选奠定了基础.
基金：
广东省科技计划项目(2013B0218003,2014A020212351)%广州市属高校重点学科建设经费资助项目(穗教高教[2011]34号)
第一作者：
第一作者机构：
[1]广州医科大学附属第一医院检验科,广东广州,510120
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
林卫虹,林勇平,杨笑涵,等.登革2型病毒NS2BH-NS3蛋白酶复合物的原核表达及活性研究[J].热带医学杂志.2016,16(08):991-994.
