摘要：
目的 观察不同缺氧复氧(H/R)损伤程度对H9c2大鼠心肌细胞自噬及细胞存活率的影响.方法 缺氧时将H9c2大鼠心肌细胞置于缺氧培养箱分别以0.5％胎牛血清(FBS)复合高糖(4.5 g/L)DMEM、无糖培养基、磷酸盐缓冲液(PBS)为缺氧液培养3h后置换完全培养基置于正常培养箱中培养3 h;取复氧后心肌细胞,MTT法检测各组心肌细胞存活率,MDC荧光染色后流式细胞仪检测心肌细胞自噬率,实时荧光定量PCR法检测细胞内自噬相关基因5(Atg5)mRNA的表达水平.结果 与对照(CON)组相比,各H/R模型组细胞存活率均降低(P<0.05),且0.5％FBS复合高糖DMEM、无糖培养基、PBS处理的H/R心肌细胞存活率逐渐下降;流式细胞仪与实时荧光定量PCR的结果显示,与对照CON组相比各H/R模型组心肌细胞自噬率与Atg5 mRNA的表达差异均有统计学意义(均P<0.05),且0.5％FBS复合高糖DMEM、无糖培养基、PBS处理的H/R心肌细胞自噬率与Atg5 mRNA的表达均逐渐下降,其中0.5％FBS复合高糖DMEM、无糖培养基处理的相对CON组是增加的,PBS处理的则是下降的.结论 利用缺氧培养箱可以造成H9c2大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤,细胞适度缺氧复氧可以激活细胞自噬,但细胞过分缺氧反而抑制自噬.
