[目的]优选土茯苓多糖硫酸化修饰的最佳条件,探讨硫酸化修饰提高土茯苓多糖活性的可能性.[方法]采用氯磺酸—吡啶法对纯化的土茯苓多糖进行硫酸化修饰,以产率、硫酸基取代度、糖含量作为考察指标,用L9(34)正交实验设计对反应时间、反应温度和氯磺酸—吡啶配比3个因素进行优化,用氯化钡—明胶法测定硫酸基的取代度(DS),用硫酸—苯酚法测定糖含量,红外光谱测定其结构,并用噻唑蓝(MTT)比色法检测正交试验中的各种硫酸化后多糖产物对肿瘤细胞HepG2和MCF-7增殖活性的影响.[结果]土茯苓多糖采用氯磺酸—吡啶法进行硫酸化修饰的最佳条件为反应时间4.5 h,反应温度60℃和试剂配比为1:6;MTT结果显示:硫酸化后的多糖产物对肿瘤细胞HepG2和MCF-7具有一定的抑制增殖作用,并与浓度呈依赖性关系.[结论]氯磺酸—吡啶法对土茯苓多糖进行硫酸化修饰是可行的,且硫酸化修饰能提高土茯苓多糖的抗肿瘤活性.