摘要：
利用大孔吸附树脂DA-201为载体对海洋脂肪酶固定化, 并探寻添加剂对固定化过程的影响.分别以NH4Cl、甘露糖和甘氨酸为添加剂, 采用单因素和正交实验相结合的方法优化条件.结果显示, 以NH4Cl为添加剂的最优条件:柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液pH 6. 0, 固定化温度30℃, 载体投放量0. 5g, NH4Cl浓度25mmol/L, 固定化时间3. 0h, 酶活力达到115. 27U/g;比不含有添加剂的固定化酶固定化效率提高47. 42％.以甘露糖为添加剂最优条件:磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液pH7. 0, 固定化温度35℃, 载体投放量0. 5g, 甘露糖浓度10mmol/L, 固定化时间4. 5h;酶活力达到122. 75U/g, 比不含有添加剂的固定化酶固定化效率提高6. 50％.以甘氨酸为添加剂的最优条件:磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液pH7. 0, 固定化温度20℃, 载体投放量0. 5g, 甘氨酸浓度为25mmol/L, 固定化时间7. 5h;酶活力达到141. 69U/g, 比不含有添加剂的固定化酶固定化效率提高26. 12％.采用不同添加剂对大孔吸附树脂DA-201的吸附固定化过程有较大影响, 可以极大地提高吸附效率;同时发现缓冲液类型、pH、温度、添加剂浓度和固定化时间等对DA-201树脂吸附脂肪酶有很大影响, 对后续吸附固定化工业酶研究有较好的参考价值.
