资源类型:
Pubmed体系:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型:
机构:
[1]广东省中医院检验科,广东,广州,510120
大德路总院
检验科
广东省中医院
[2]南方医科大学南方医院检验科,广东,广州,510515
[3]广东医学院检验学院,广东,东莞,523808
出处:
ISSN:
关键词:
人CD96基因
原核表达
白血病干细胞
多克隆抗体
摘要:
目的 原核表达并纯化人CD96胞外区蛋白,免疫家兔制备抗体.方法 构建pET32-CD96重组质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,Ni2+-NTA树脂纯化蛋白并免疫家兔,以间接ELISA检测抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性.结果 质粒pET32-CD96经测序鉴定,通过SDS电泳显示能在BL21(DE3)中高效表达,相对分子质量约37 000;Western blot实验结果显示制备的多克隆抗体可与HL-60细胞提取蛋白及原核表达的人CD96蛋白胞外区特异性结合.结论 成功构建并表达人CD96胞外区蛋白,免疫家兔获得高滴度抗血清,为后续研究奠定了基础.
基金:
广东省医学科学技术研究基金(B2008066)
基金编号:
B2008066
PubmedID:
第一作者:
第一作者机构:
[1]广东省中医院检验科,广东,广州,510120
共同第一作者:
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
曾建明,刘飞,谭坪海,等.人CD96基因胞外区的原核表达及抗血清制备[J].南方医科大学学报.2011,31(07):1232-1235.